A estrutura do fitocromo A de Arabidopsis revela diversificação topológica e funcional entre as isoformas fotorreceptoras da planta
Nature Plants (2023)Cite este artigo
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As plantas empregam uma coorte divergente de fotorreceptores de fitocromo (Phy) para governar muitos aspectos da morfogênese por meio de fotointerconversão reversível entre Pr inativo e conformadores ativos de Pfr. Os dois mais influentes são PhyA, cuja retenção de Pfr permite a sensação de luz fraca, enquanto a relativa instabilidade de Pfr para PhyB o torna mais adequado para detectar sol pleno e temperatura. Para entender melhor esses contrastes, resolvemos, por microscopia crioeletrônica, a estrutura tridimensional de PhyA de comprimento total como Pr. Como o PhyB, o PhyA dimeriza por meio da montagem cabeça-a-cabeça de seus domínios relacionados à histidina quinase C-terminal (HKRDs), enquanto o restante se monta como uma plataforma responsiva à luz cabeça-cauda. Enquanto a plataforma e os HKRDs se associam assimetricamente nos dímeros PhyB, essas conexões desiguais estão ausentes no PhyA. A análise de truncamento e mutantes direcionados ao local revelou que esse desacoplamento e montagem de plataforma alterada têm consequências funcionais para a estabilidade de Pfr de PhyA e destaca como a diversificação estrutural de Phy da planta ampliou a percepção de luz e temperatura.
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Dados de origem para todos os gráficos de reversão térmica Pfr→Pr nas Figs. 5–7 são fornecidas na Tabela 2 complementar. Imagens de géis SDS-PAGE completos são fornecidas na Fig. 3 complementar. O mapa de consenso crio-EM 3D do dímero PhyA de Arabidopsis completo com resolução de 3,2 Å foi depositado no EMDB banco de dados sob o código de acesso EMD-28870. A plataforma de foco refinado e os mapas HKRD com resolução média de 3,1 Å e 3,4 Å, respectivamente, foram depositados no banco de dados EMDB sob os códigos de acesso EMD-28871 e EMD-28872. O mapa 3D composto foi depositado no banco de dados EMDB sob o código de acesso EMD-28869, e seu modelo atômico correspondente está disponível no banco de dados RCSB sob o código PDB 8F5Z. Este estudo fez uso de várias estruturas de proteínas publicamente disponíveis para Phys e histidina quinases transmissoras que foram obtidas do banco de dados RCSB (http://www.rcsb.org) sob os códigos de acesso 2VEA, 6TC5, 6TC7, 6TL4, 4U7O e 7RZW. Os dados de origem são fornecidos com este documento.
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